Duplication of insertion element IS50 associated with Tn5 transposition in Azospirillum brasilense

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Abstract

The characterization of a DNA fragment with a Tn5 insertion in a regulatory nif gene of Azospirillum brasilense is reported. Restriction endonuclease mapping, Southern hybridization with a Tn5 probe, and nucleotide sequencing revealed that IS50 had duplicated in Tn5. The duplication of an IS50 element suggests the occurrence of a replicative mechanism of transposition. A strategy, based on the bacterial ability of homologous recombination that was used to precisely eliminate Tn5 along with the duplicated IS50 element, is presented.

Nous avons caractérisé un fragment d'ADN contenant une insertion Tn5 dans le gène régulateur nif chez Azospirillum brasilense. La cartographie avec des endonucléases de restriction, l'hybridation Southern avec une sonde Tn5 et le séquençage des nucléotides ont révélé que IS50 s'était dupliqué dans Tn5. Cette duplication d'un élément IS50 suggère la présence d'un mécanisme réplicateur de transposition. Nous décrivons une stratégie, basée sur la capacité bactérienne à faire des recombinaisons homologues, et qui a été utilisée précisément pour éliminer Tn5 en même temps que l'élément IS50 dupliqué. [Traduit par la Rédaction]

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