Evaluation of cytology collection techniques and prevalence of Malassezia yeast and bacteria in claw folds of normal and allergic dogs

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Abstract

Background

Canine bacterial and Malassezia paronychia are common secondary complications of atopic dermatitis and adverse food reactions.

Hypothesis/Objectives

The aim of this study was to compare three different sampling methods for claw fold cytology and to evaluate the numbers of bacteria, Malassezia yeast and inflammatory cells.

Animals

Sixty client-owned dogs were classified into three groups: (A) normal dogs; (B) allergic dogs with no clinical evidence of claw disease (brown staining, erythema, swelling, crusts or exudates); and (C) allergic dogs with clinical paronychia.

Methods

A prospective, blinded, split-plot study design was used. Claw folds from each dog were sampled using either a toothpick, tape preparation or direct impression smear. Slides were evaluated by two investigators for inflammatory cells, nuclear streaming, debris, corneocytes, yeast, intracellular (IC) cocci, extracellular (EC) cocci, IC rods and EC rods. For each parameter, data were compared between groups and between methods. Inter-reader agreements were calculated.

Results

Group C had significantly higher values of EC cocci and corneocytes than Groups A or B. Although Malassezia organisms were more prevalent in allergic dogs than normal dogs, the counts were not significantly different. There were significantly higher numbers of Malassezia organisms (P = 0.0016) and EC cocci (P = 0.0106) retrieved from samples collected with a toothpick compared to other methods. Tape preparations were associated with significantly more debris and corneocytes (both P < 0.0001) and impression smears with significantly more nuclear streaming (P = 0.0468).

Conclusions and clinical importance

Sample collection using a toothpick optimizes the value of cytological results when sampling allergic dogs with clinical paronychia.

Contexte

Une paronychie bactérienne ou à Malassezia est une complication fréquente de la dermatite atopique et des réactions alimentaires indésirables.

Hypothèses/Objectifs

Le but de cette étude est de comparer trois méthodes différentes de prélèvements de cytologie du bourrelet unguéal et d'évaluer le nombre de bactéries, Malassezia et cellules inflammatoires.

Sujets

Soixante chiens de propriétaires ont été classés en trois groupes : (A) chiens sains; (B) chiens allergiques sans signe de maladie des griffes (coloration brune, érythème, suintement, croûtes ou exsudat); et (C) chiens allergiques avec paronychie clinique.

Méthodes

Une étude pilote prospective en aveugle a été réalisée. Les bourrelets unguéaux de chaque chien ont été prélevés par impression directe, cellophane ou cure-dent. Les lames ont été évaluées par deux investigateurs pour les cellules inflammatoires, les filaments de chromatine, les débris, les cornéocytes, les levures, les coques intracellulaires (IC), extracellulaires (EC), les bâtonnets IC et les bâtonnets EC. Pour chaque paramètre, les données étaient comparées entre les groupes et entre les méthodes. Les concordances inter-observateurs ont été calculées.

Résultats

Le groupe C avait des valeurs significativement plus élevées pour les cocci EC et les cornéocytes que les groupes A ou B. Bien que les Malassezia soient plus prévalentes chez les chiens allergiques que chez les chiens sains, leurs dénombrements n'étaient pas significativement différents. Les nombres de Malassezia (P = 0.0016) et de EC cocci (P = 0.0106) étaient significativement plus élevés lorsque prélevés à l'aide de cure-dents comparés aux autres méthodes. Les tests par cellophane étaient associés à un plus grand nombre de débris et de cornéocytes (P < 0.0001) et les calques par impression présentaient davantage de filaments de chromatine (P = 0.0468).

Conclusions et importance clinique

La méthode de prélèvement à l'aide d'une cure dent optimise la valeur des résultats cytologiques pour des prélèvements de chiens allergiques avec paronychie.

Introducción

la paroniquia bacteriana y por Malassezia en perros son complicaciones secundarias comunes de la dermatitis atópica y de las relaciones alimentarias adversas

Hipótesis/Objetivos

el propósito de este estudio fue comparar 3 métodos diferentes de toma de muestras para la citología del pliegue de la uña y evaluar el número de bacterias, levaduras Malassezia y células inflamatorias.

Animales

60 perros de propietarios privados fueron clasificados en tres grupos: (A) perros normales; (D) perros alérgicos sin evidencia de enfermedad de las uñas (tinción marronácea, eritema, hinchazón, costras o exudados); y (C) perros alérgicos con paroniquia clínica.

Métodos

se utilizo un estudio prospectivo, ciego, de subdivisión de grupos (split-plot). Los pliegues de las uñas de cada perro fueron muestreados utilizando bien un palillo de dientes, una preparación con cinta adhesiva, o una impresión directa en el porta. Los portas fueron evaluados por dos investigadores buscando células inflamatorias, estrías nucleares artefactual es, detritus, corneocitos, levaduras, cocos intercelulares (IC), cocos extracelulares (EC), bacilos intercelulares (IC) y bacilos extracelulares (EC). Para cada parámetro los datos fueron comparados entre grupos y entre los métodos. Se calculó la similitud entre investigadores.

Resultados

el grupo C tuvo valores significativamente mayores de cocos extracelulares y corneocitos que los grupos A o B. Aunque los organismos de tipo Malassezia fueron más prevalentes en los perros alérgicos que en los perros normales, los contajes no fueron significativamente diferentes. Hubo un número significativamente mayor de organismos tipo Malassezia (P = 0,0016) y cocos extracelulares (P = 0,0106) en las muestras tomadas con un palillo comparadas con otros métodos. Las preparaciones con cinta adhesiva se asociaron con presencia de mayor detritus y corneocitos (ambos P <0,001) y las preparaciones por impresión directa tenían mayor cantidad de estrías nucleares (P = 0,0468).

Conclusión e importancia clínica

la toma de muestras con un palillo optimiza el valor de los resultados citológicos cuando se toman muestras de perros alérgicos con paroniquia clínica.

Hintergrund

Bakterielle Krallenbettinfektionen und Infektionen mit Hefepilzen sind häufige sekundäre Komplikationen bei atopischer Dermatitis und Futtermittelreaktionen.

Hypothese/Ziele

Das Ziel dieser Studie war ein Vergleich der drei unterschiedlichen Probeentnahmemethoden für die Zytologie des Krallenfalzes und eine Evaluierung der Bakterienzahlen, der Malassezia Hefen und der Entzündungszellen.

Tiere

Sechzig Hunde in Privatbesitz wurden in drei Gruppen eingeteilt: (A) normale Hunde; (B) allergische Hunde ohne klinische Evidenz einer Krallenerkrankung (Braunfärbung, Erythem, Schwellung, Krusten oder Exudat); und (C) allergische Hunde mit klinischer Paronychie.

Methoden

Eine prospektive, geblindete, Split-Plot Design Studie wurde verwendet. Von jedem Hund wurden vom Krallenfalz entweder mittels Zahnstocher, Klebestreifen oder direktem Abklatsch Proben genommen. Die Objektträger wurden von zwei UntersucherInnen evaluiert und das Auftreten von Entzündungszellen, Kernstreaming, Debris, Corneozyten, Hefen, intrazelluläre (IC) Kokken, extrazelluläre (EC) Kokken, IC Stäbchen und EC Stäbchen beurteilt. Für jeden Parameter wurden die Ergebnisse zwischen den Gruppen und zwischen den Methoden verglichen. Die Übereinstimmung zwischen den UntersucherInnen wurde kalkuliert.

Ergebnisse

Gruppe C wies signifikant höhere Werte an EC Kokken und Corneozyten auf als die Gruppen A oder B. Obwohl Malassezia Organismen bei allergischen Hunden häufiger auftraten als bei normalen Hunden, waren die Zahlen nicht signifikant unterschiedlich. Es bestanden signifikant höhere Zahlen an Malassezia Organismen (P=0,0016) und EC Kokken (P=0,0106) in Proben, die mittels Zahnstocher im Vergleich zu den anderen Methoden entnommen worden waren. Die Klebestreifenpräparate zeigten signifikant mehr Debris und Corneozyten (beide P<0,0001) und Abklatschpräparate weisen signifikant mehr Kernstreaming auf (P=0,0468).

Schlussfolgerungen und klinische Bedeutung

Probenahme mittels Zahnstocher optimiert die Aussagekraft der zytologischen Ergebnisse bei Proben von allergischen Hunden mit klinischer Paronychie.

Background – Canine bacterial and Malassezia paronychia are common secondary complications of atopic dermatitis and adverse food reactions. Hypothesis/Objectives – The aim of this study was to compare three different sampling methods for claw fold cytology and to evaluate the numbers of bacteria, Malassezia yeast and inflammatory cells. Conclusions and clinical importance – Sample collection using a toothpick optimizes the value of cytological results when sampling allergic dogs with clinical paronychia.

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